(五)活性炭-Oelite柱色譜淨化
在具抽真空側口的农药色譜柱尾頂端塞上單孔5號橡皮塞，接上500mL圓底燒瓶，选择性多打開色譜柱活塞，残留連接抽真空裝置。农药
在色譜柱中先後加入0.5g矽烷化Celite和5g活性炭Celite混合物，选择性多並使之填塞緊密。残留在吸附劑上麵塞入1～2cm玻璃棉，农药用50mL25%甲苯-乙腈淋洗液預洗，选择性多當預洗液接近玻璃棉頂端0.5cm處時關閉柱活塞，残留斷開真空裝置，农药棄去圓底燒瓶中的选择性多溶液，重新將其接上色譜柱。残留將已製備好的农药10mL二氯甲烷提取液上柱，以5mL/min的选择性多速度淋洗。分別用10mL二氯甲烷和25mL淋洗液洗1L圓底燒瓶，残留並將洗出液分別上柱淋洗，當淋洗液接近玻璃棉頂端時加入下一溶液。
加人100mL淋洗液，並以5mL/min的速度淋洗。當淋洗液接近玻璃棉頂端時關閉柱塞。用真空旋轉蒸發器將500mL圓底燒瓶中的淋出液濃縮至幹，並立即取下圓底燒瓶。在500mL圓底燒瓶中立即加入5mL甲醇，以溶解提取淨化後的殘留農藥。對於高含水量樣品，需用每毫升溶液含有相當於20g樣品的提取液上色譜柱淨化；對於低含水量樣品，需用每毫升相當於10g樣品的提取液上柱淨化
1、矽烷化助濾劑：Celite 545的製備用鹽酸-水(1∶1)在2L燒杯中將150g助濾劑Celite 545(以下簡稱Celite)調成漿狀，蓋上玻璃蓋，沸點下磁力攪拌子攪拌10min。冷卻，過濾，用蒸話水洗至中性。先後用500mL甲醇和二氯甲烷洗Celite，並將其在通風櫥中自然晾幹。將Celite轉移至1L具塞錐形瓶中，在120℃烘箱中加熱幹燥過夜(打開瓶塞)後，置於幹燥器冷卻。
將錐形瓶置於通風櫥，準確吸取3mL二氯二甲基矽烷加入錐形瓶中，使之與Celite充分混合，室溫下保存4h。在錐形瓶中加入500mL甲醇，搖勻，靜置15min。過濾矽烷化Celite，用異丙醇洗至中性。在通風櫥中將矽烷化Celite自然晾幹，除去異丙醇。在105℃烘箱中將矽烷化Celite幹燥2h，並在幹燥器中冷卻。將其保存於具塞容器中。
通過2個試驗測定CeIite的矽烷化效果。一種方法是取大約1g Celite置於50mL水中，矽烷化Celite會漂浮；另一種方法是取1g Celite置於20mL用甲基紅飽和的甲苯中，矽烷化Celite會呈黃色。在上述兩種方法中，如果Celite顆粒在水中下沉並且(或)在甲基紅飽和的甲苯中呈粉紅色，則Celite中仍存在活性部位，需要重新進行矽烷化處理。
2、活性炭的純化：用700mL鹽酸將100g活性炭Nuchar S1N調成漿狀，蓋上玻璃蓋，沸點下磁力攪拌子攪拌1h。
加700mL水，沸點下再攪拌30min。冷卻，過濾，用水洗至中性。先用500mL甲醇然後用500mL二氯甲烷洗活性炭，在通風櫥中自然晾幹。在120℃烘箱中幹燥4h後，置於幹燥器中冷卻，並將其保存於具塞容器中。
3、活性炭-Celite柱的活性測定：按上述方法製備活性炭-Celite(1∶4，m/m)淨化柱；製備濃度為5μg／mL的不同氨基甲酸酯殺蟲劑(西維因、滅蟲威、滅蟲威亞碸、滅多威)的甲醇溶液。滅蟲威亞碸在溶液中易分解，混合標樣應在使用前現配現用。分別吸取5mL上述溶液加入250mL圓底燒瓶和25mL容量瓶中，用甲醇將溶液定容至25mL，作為高效液相色譜(HPLc)分析的標樣。
按上述方法用真空旋轉蒸發器將圓底燒瓶中的標準樣品溶液蒸發至幹。當最後痕量的甲醇被蒸發完全後，將圓底燒瓶從蒸發器上取下，用10mL二氯甲烷將氨基甲酸酯殘留物溶解。將圓底燒瓶中的二氯甲烷溶液過已製備好的吸附柱，並按上述方法淋洗。
將淋出液濃縮至幹，用甲醇溶解，定容至25mL。按測定方法測定氨基甲酸酯的量，並計算其回收率。如果回收率≥95％，則活性炭是達到要求的。
(六)測定
采用高效液相色譜儀測定，柱後衍生化，熒光檢測。
1、 原理
甲醇溶液中的農藥殘留以乙腈-水為流動相，通過C8反相高效液相色譜柱，進行梯度洗脫分離。柱後淋出液中的農藥殘留在堿性條件下被在線水解為甲胺化合物，該化合物與鄰苯二醛和2-巰基乙醇在線反應，生成熒光基團，通過熒光檢測器檢測。這一柱後衍生化熒光檢測的測定方法對於含有氨基甲酸酯結構的農藥殘留具有很好的選擇性。
2、儀器
(1)溶劑過濾裝置：具Luer-Lip頭的10mL注射器，配有直徑為13mm的Swinny不鏽鋼過濾頭和直徑為13mm的5．0μm LS型過濾器，也可配備直徑為13mm用聚丙烯固定的0．22μm尼龍濾膜。也可選擇使用預裝好的無需注射器的裝置。高效液相色譜儀包括下列組件(圖7-2)：流動相傳輸係統、程序控製的高效液相色譜梯度洗脫係統、進樣器(具有10μL進樣環的自動取樣器)、不鏽鋼保護柱(內含25～37μm的C8或C18濾芯)、柱溫箱或柱加熱器、分析柱 [25cm×4.6mm(內徑)，填充6μm Zorbax C8球形顆粒，柱填充物包括5μm或6μm由辛矽烷試劑鍵合形成的單分子球形結合物]。連接管[編號為304的不鏽鋼管(外徑為1.6mm，內徑為O.18mm)]連接進樣器、色譜柱與第一個T形管。
(2)柱後衍生單元：該單元由下列組件構成：Tericon塗層的玻璃柱[60cm×25mm(內徑)作為儲液器，柱內存有氫氧化鈉和OPA-MER(二反應溶液；通氮氣增加柱壓，並通過調節壓力大小控製合適的溶液流速，可以用泵代替氮氣增壓]、Tefton限製管[6m×0.5mm(內徑)，其將每個儲液器與15cm)4 0.18mm(內徑)的不鏽鋼管相連接，該不鏽鋼管依次與內徑為0.74mm的不鏽鋼T形混合器(如ZVT-062)相連，與流動相相通]、氨基甲酸酯水解室[不鏽鋼管、3m×0.48mm(內徑)，編號為321，繞有與小型烘箱相連的加熱管以維持水解室的溫度始終保持在1000C、反應管[25cm不鏽鋼管，一端與T形混合器相連以輸送OPA-MERC溶液，另一端連接檢測器內腔，1.5cm×0.3mm(內徑)]。
目前可以從一些廠家購買商品化的柱後衍生反應裝置，以代替上述組件。該反應裝置最好配備雙泵。
(3)熒光檢測器：熒光檢測器為雙單色器，配有≤20pL的腔體。
(4)記錄儀：記錄儀為帶狀製圖儀或者與檢測器連用的自動積分儀。
參考資料：農藥殘留分析，版權歸原作者所有，如涉及作品內容、版權等問題，請與本網聯係。
相關鏈接：色譜柱，農藥，氨基甲酸酯，濾膜
